產品名稱:pPha-T1質粒
供應商:遠慕生物
規(guī)格:0.5-2ug
質粒分類:其他宿主載體

pPha-T1質粒 使用說明:
1、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl無菌水溶解質粒,室溫放置1min;
2、從-80℃冰箱中取出相應的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標記;
3、取2μl質粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min;
4、42℃熱激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min;
6、6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;
7、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;
8、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h;
9、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實驗需要提取質粒。
pPha-T1質粒注意事項:
1、如果您收到的是甘油菌種,請先四區(qū)劃線,挑取單克隆培養(yǎng)。
2、如果第二天轉化平板長的過多,請將質粒按比例稀釋后再轉化。
供應商:遠慕生物
規(guī)格:0.5-2ug
質粒分類:其他宿主載體

pPha-T1質粒 使用說明:
1、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl無菌水溶解質粒,室溫放置1min;
2、從-80℃冰箱中取出相應的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標記;
3、取2μl質粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min;
4、42℃熱激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min;
6、6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;
7、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;
8、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h;
9、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實驗需要提取質粒。
pPha-T1質粒注意事項:
1、如果您收到的是甘油菌種,請先四區(qū)劃線,挑取單克隆培養(yǎng)。
2、如果第二天轉化平板長的過多,請將質粒按比例稀釋后再轉化。